Выставка "Фиалки на Пятницкой-2015"

[NinaStar]

Владимир Николаевич рассказал, что 15 лет назад, когда сортов фиалок было еще мало, большее разнообразие к нам приходило из-за океана листиками. В то время попробовали использовать метод микроклонального размножения растений для размножения фиалок. Благодаря данному методу культуры тканей из одного листика в лаборатории получали 200 растений. Этот метод имеет неоспоримые преимущества перед многими другими методами размножения. Это прежде всего,
- очень быстро можно получить очень много растений из небольшого количества растительного материала;
- получаются здоровые растения. Данный метод используют для оздоровления растительного материала от различных инфекций, в том числе и вирусных.
Но со временем необходимость в этом отпала. Во-первых, появилось очень большое разнообразие и количество отечественных сортов (под этим мы всегда подразумеваем наших селекционеров на всем постсоветском пространстве), а во-вторых, появилось много и американских сортов. К тому же ряды фиалководов стали пополняться новыми коллекционерами, которые очень быстро, в домашних условиях размножают вновь появляющиеся сорта и из огромного количества сортов вспоминают старые, которые невозможно забыть.

[NinaStar]

Метод культуры клеток, органов и тканей – метод микроклонального размножения растений, иногда его называют меристемным методом, что не совсем точно, потому что это только одно направление, когда используют меристемы растений (побегов, корней) для оздоровления и размножения растений. Метод культуры клеток и тканей был разработан в середине прошлого века. У нас это направление также активно начало развиваться в середине прошлого века с 1957 года в институте Физиологии растений АН СССР в лаборатории Бутенко Раисы Георгиевны, члена-корреспондента АН СССР, академика ВАСХНИЛ. Данное отступление сделала специально, потому что в интернете можно встретить, что наконец-то, и у нас этот метод начал развиваться. Нет, он развивается давно. Сейчас много лабораторий, институтов, в которых данный метод активно используется, как в прикладной биологии (оздоровление и размножение растений), так и в фундаментальной науке. В ряде учебных вузах студенты на практикумах знакомятся с этим методом и сами получают, например, из листика, корешка, сначала каллус (неорганизованный рост клеток), а затем наблюдают развитие корней или побегов из этой массы в зависимости от того, какие гормоны растений или их синтетические аналоги добавляют в питательную среду.

[NinaStar]

Наш гость - Чанг-Тонг Шек – рассказал, что их группа в Гонконге проводит
- Социальные встречи
- Групповые покупки растений в США иТайване
- Мероприятия по сбору средств больным детям, в том числе российским
- Конкурсы и мастер-классы по посадке растений
Поэтому они через Facebook «Little Violet» общаются, сообщают о встречах и различных мероприятиях. Посещает сайт порядка 1000-1200 подписчиков.

[NinaStar]

В рамках передачи опыта занимаются популяризацией метода культуры тканей среди населения. Если Вы посмотрите в интернете, то увидите, что в Гонконге очень любят химеры. А, как Вы знаете, признаки химер при размножении листиками практически не передаются. Использование метода культуры клеток, органов и тканей приводит практически к 100%-ному успеху. Метод заключается в том, что при стерильных условиях помещаются кусочки тканей или органов на стерильную среду и, в зависимости, от содержания в ней гормонов растений, чаще всего ауксинов и цитокининов, или их синтетических аналогов (а они используются чаще для таких целей) получают:
1. Каллус – неорганизованный рост клеток. Ауксинов и цитокининов должно быть одинаковое соотношение. Каллусные клетки можно увидеть при проращивании листиков: они образуют утолщение на кончике черешка листика, из массы этих клеток потом образуются корни и детки.
2. Побеги. Цитокининов должно быть больше, чем ауксинов.
3. Корни. Ауксинов должно быть больше, чем цитокининов.
Какие конкретно вещества и их концентрация подбирается для каждого вида растения экспериментально.
В методике гонконгской группы используют в качестве ауксина - α-нафтилуксусную кислоту (НУК), в качестве цитокинина – 6-бензиламинопурин (6-БАП). Оба вещества являются синтетическими аналогами природных фитогормонов.

[NinaStar]

Вся методика состоит из трех основных шагов.
Шаг 1. Приготовление питательной среды. Среда для выращивания должна содержать
макроэлементы, прежде всего: азот, фосфор, калий;
микроэлементы,
сахара,
витамины,
регуляторы роста (гормоны растений или их аналоги).
В качестве основы для среды используется среда Мурасиге-Скуга, предложенная Мурасиге и Скугом в 1962 году. Состав можно легко найти в интернете. К этой основе добавляются 3% сахарозы, 200 мг/л гидролизата казеина, 0,6% агар-агара (нейтральное вещество, требуется для затвердевания среды), по 1 мг/л 6-БАП и НУК. Кислотность среды – pH – должна поддерживаться на уровне 5,7. Эти добавки рекомендованы в работе R. Daniel Lineberger и Mark Druckenbrod (1985г.), которые в своем исследовании показали, что размножение периклинальных химер пазушными почками приводит к успеху в 80-95% случаев в зависимости от сорта фиалок.
В связи с тем, что все проводится не в идеально стерильных условиях, то в среду добавляются противогрибковые препараты.

[NinaStar]

После растворения всех ингредиентов среда разливается по баночкам для выращивания культуры тканей и стерилизуется. В домашних условиях простерилизовать можно либо в скороварке в течение 15-20 минут, либо в микроволновой печи 3-4 минуты. Перед стерилизацией необходимо слегка раскрутить крышки у баночек для выращивания, чтобы они не были герметично закрыты. В микроволновую печь можно ставить только по одной баночке.
Шаг 2.Выбрать и подготовить цветоносы. Предварительно необходимо подобрать хорошие крепкие цветоносы с двумя прилистниками, оборвать цветочки и оставить их еще на одну неделю на растении.

[NinaStar]

Через неделю обрезать . Нижний пенек, от нижнего кончика до прилистников должен иметь длину примерно 1-1,5 см, а пеньки над цветоносами – 0,3-0,5 см. Такая величина связана с тем, что на раневой поверхности происходит гибель клеток в стерилизующих растворах.

[ЦветкА]

Уважаемая Татьяна Валькова! Не нахожу слов передать свое восхищение от Вашей селекции!!!!!!
Столько интересного и Нового!!! А мне, как коллекционеру, именно Новое интересно - УДАЧИ, УДАЧИ, УДАЧИ ВАМ!!!
Есть только один нюанс - о нем судить общественности: когда получаются красивые сеянцы, но типичные уже существующим сортам - стоит ли их оставлять и делать новыми сортами?

[NinaStar]

Шаг 3. Дезинфицирование и посадка цветоносов в стерильную среду.
Дезинфекция цветоносов проводится по схеме:
70% этиловый спирт – 10 сек. Для удаления жировых отложений.
10% отбеливатель (или хлорка: 1г на 100 мл воды) – 10 мин.
70% спирт – 1 мин. С этого момента все выполняется в стерильных условиях.
2 раза промыть в стерильной воде по 1 минуте.

[NinaStar]

В лабораториях для работы в стерильных условиях используют ламинары. Это столы закрытые со всех сторон, на стороне, которая напротив сидящего, расположены специальные фильтры, не пропускающие микробы. Во время всей работы на работающего идет струя стерильного воздуха. Предварительно вся внутренняя поверхность протирается 70% спиртом. Именно 70% спирт наиболее эффективен при стерилизации, а не 96% или 40%. Рекомендуется затем прожечь ультрафиолетовой лампой в течение 20-30 мин. Продуть воздух через фильтры на задней панели ламинара 20 минут, потому что озон, который образуется при обработке ультрафиолетовой лампой, в больших концентрациях не очень полезен для организма. Затем можно работать при постоянной продувке стерильным воздухом.

[NinaStar]

Иногда для большей подстраховки ставят спиртовку или горелку, потому что на расстоянии 30 см от огня воздух стерилен. Должна при этом строго соблюдаться техника безопасности при работе с открытым огнем. Работа в стерильном поле огня всегда использовалась в работе микробиологов, когда еще не существовало ни микробиологических боксов, ни ламинаров.
Но так как гонконгская группа популяризирует культуру тканей среди простого населения, то они предлагают использовать открытые с двух сторон для рук короба из оргстекла. Внутреннюю поверхность и воздух опрыскивают из пульверизатора 70% спиртом, стерилизуют инструмент, пинцет, в 70% спирте. Всю дальнейшую работу от переноса из 70% спирта в стерильную воду и посадку в стерильную среду проводят внутри этого короба.

[NinaStar]

Стерильным пинцетом быстро переносить цветонос из спирта в стерильную воду на 1 минуту, затем еще в одну воду. После промывки цветоносы помещают на стерильную среду.

[NinaStar]

Закрытые баночки помещают на полки с искусственным освещением 16 ч и температурой 15-25 °С на 8-12 недель. За это время просыпаются пазушные почки у прицветников, нарастает каллус, в нем образуются центры регенерации, из которых образуются побеги. Но только проснувшиеся пазушные почки дают правильное химерное цветение. Поэтому чтобы эти почки лучше и быстрее росли все остальные желательно удалять (в стерильных условиях, конечно).

[NinaStar]

Когда пазушные почки подрастут, их отделяют от цветоноса, уже в нестерильных условиях, затем сажают в нестерильную смесь торфа с перлитом 1:1. Когда маленькие растения дадут корешки, их пересаживают в почву для роста фиалки.

[NinaStar]

В результате такого размножения химер получается почти 100% растений с правильным химерным окрасом и достаточно быстро.
В общем, мы делаем практически тоже самое с цветоносами, только в нестерильных условиях. Правда, у нас не всегда получается положительный результат.
Но сколько коллекционеров, столько и способов и подходов к выращиванию и размножению фиалок.
Владимир Николаевич показал нам свой способ размножения сорта химерных фиалок. Для этого он использует пасту KeikiGrow plus. Основа этой пасты ланолин, в ней содержится 1 % 6-БАП (6-Бензиламинопурин). Владимир Николаевич набирает на кончик острой деревянной палочки пасту и очень аккуратно процарапывает то место, где должны будут образоваться новые детки. Необходимо следить, чтобы паста попала на раневую поверхность.